产品货号:
M20254
中文名称:
XbaI内切酶(不含动物源性成分)
英文名称:
Xba I Endonuclease, ADCF
产品规格:
5000U
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品经过基因工程重组,能够在5~15分钟内精确完成质粒DNA、PCR产物或基因组DNA等的快速酶切。本制品不含动物源性相关成分(ADCF),有良好的酶活冗余度,可轻松应对底物过量或困难模板酶切。
1活性单位(U)是指在50μL反应体系中,37℃ 1h内完全酶切1μg λDNA (Dam-/HindIII digest)所需的酶量。
组分 | 规格 |
Xba I(ADCF,20U/μL) | 250μL |
10×Xba I Buffer(ADCF) | 2×1mL |
保存:-20℃,有效期2年。
- 不同DNA中的Xba I酶切位点数量:
λDNA ΦX174 pBR322 pUC57 pUC18/19 SV40 M13mp18/19 Adeno2 1 0 0 1 1 0 1 5 - DNA甲基化修饰对Xba I酶切影响:
Dam Dcm CpG EcoKI EcoBI 剪切阻断 无影响 剪切阻断 无影响 无影响
- 反应体系中加入的酶体积不应超过总体积的10%,避免酶中过多的甘油引起星号活性。
- 限制性内切酶储存缓冲液中的添加剂(如甘油、盐)与底物溶液中的污染物(如盐、EDTA或乙醇等)相同,反应体积越小,酶切反应抑制效应越强。
- 本制品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- DNA酶切流程:
- 在冰上按下表配制反应体系:
成分 用量 ddH2O 至50μL 10×Xba I Buffer(ADCF) 5μL 底物DNA 1μg Xba I(ADCF,20U/μL) 10~20U 总体积 50μL - DNA底物中应不含苯酚、氯仿、乙醇、EDTA、洗涤剂或高浓度盐,否则将会影响Xba I的酶活性。
- 轻轻吸打或轻弹管壁混匀反应液。切勿涡旋。瞬时离心收集挂壁液滴。
- 37℃孵育15~60min。一般推荐5~10U酶/μg质粒DNA/PCR产物、10~20U酶/μg基因组DNA。如需过夜,请将酶量调整至1U。
- 可选步骤:80℃孵育20min可使酶失活,停止反应。也可通过吸附柱或苯酚/氯仿纯化终止反应。
- 在冰上按下表配制反应体系:
- 小体系反应体系:
成分 10μL体系 25μL体系 DNA 0.1μg 0.5μg Xba I(ADCF,20U/μL) 1U 5U 10×Xba I Buffer(ADCF) 1μL 2.5μL ddH2O 至10μL 至25μL - 若总反应体系为10μL,孵育时间不要超过1h,避免蒸发。
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